SEC-MALS分子量检测
SEC-MALS(Size Exclusion Chromatography - Multi-Angle Light Scattering)是一种联用尺寸排阻色谱(SEC)和多角度激光散射(MALS)以精确测量分子质量和分子大小的绝对测定技术。SEC根据不同分子量大小的蛋白通过多孔载体时所用的时间不
互作蛋白质谱鉴定
互作蛋白质谱鉴定是一种利用质谱技术研究蛋白质相互作用的方法,其通过免疫(共)沉淀、亲和纯化等方法分离目标蛋白质复合物;再利用蛋白质酶消化产生肽段,使用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)分析肽段;最后,基于质谱数据,结合生物信息学工具,鉴定和定量互作蛋白。互作蛋白质谱鉴定可以鉴定或验证相互作
基于cIEF的电荷异质性分析
电荷异质性是生物大分子如抗体、酶和蛋白质等的一个关键属性,它影响到分子的稳定性、溶解度和生物活性。脱酰胺、氧化、糖基化、糖化、N末端或者C末端的变化、三维结构的丧失或者二硫键的还原等原因都可能造成电荷异质性改变。由于电荷异质性直接或间接地影响生物大分子的药效和安全性,因此其分析在生物药物的研发和生产
O糖基化位点分析
O糖基化是除N糖基化外另一种重要的蛋白质糖基化修饰,与N糖基化不同的是,O糖链通常附着在丝氨酸(Ser)或苏氨酸(Thr)残基上。O糖基化位点分析通常涉及多个步骤,包括蛋白质提取、蛋白质酶解、富集O糖基化肽段、液相色谱质谱分析等。通过分析O糖基化位点,可以了解蛋白质O糖基化状态的详细信息,以及这种翻
基于离子色谱的电荷异质性分析
在生物制药过程中,尤其蛋白质和抗体药物,电荷异质性分析对于理解和控制生产过程的质量至关重要,荷电状态不同的分子之间的互动可能会影响药物的生物活性、免疫原性、半衰期以及荷电稳定性等,从而影响药物的疗效、稳定性和安全性。离子色谱(Ion Chromatography,IC)是一种广泛应用于生物大分子的电
如何使用FASP或in-gel digestion处理膜蛋白样本?
膜蛋白因其高度疏水性、低溶解度以及易聚集的特性,一直被视为蛋白质组学研究中的技术难题。为了实现对膜蛋白的高效提取、消化与质谱分析,样本前处理策略的选择尤为关键。其中,FASP(Filter-Aided Sample Preparation) 和 in-gel digestion(凝胶内消化) 是两种
TMT分析流程常见挑战及解决方案
Tandem Mass Tag(TMT)是一种广泛应用于高通量定量蛋白质组学的标记定量技术,凭借其多重标签能力、高定量精度和样本并行分析的优势,成为研究疾病机制、生物标志物筛选、药物作用机制等方向的利器。然而,在实际应用中,TMT分析流程也存在诸多挑战,若处理不当,可能严重影响数据质量和研究结论的可
N/C端序列分析
C端序列是蛋白质和多肽的重要结构与功能部位,对蛋白质的生物功能甚至起决定性作用。蛋白质C端测序方法主要有羧肽酶法、化学法和串联质谱法。每种方法都有各自的有缺点。因此,结合多种不同的测序方法能够适应多种蛋白质测序的要求。比如Edman降解法不能解决N端封闭和蛋白质修饰的测序问题,当遇到这种情况的时候可
细胞蛋白质组学
细胞蛋白质组学(Cellular proteomics)是一门研究细胞内所有蛋白质的表达、修饰、相互作用及功能的科学。作为蛋白质组学的一个重要分支,细胞蛋白质组学的发展历程与蛋白质组学的发展密切相关。1995年“蛋白质组学”一词被首次提出,标志着蛋白质组学研究正式开始。随着
植物蛋白质组学
植物蛋白质组学(Plant Proteomics)是蛋白质组学领域的一个分支,旨在研究植物蛋白质的组成、结构、功能、相互作用及调控机制等,其研究方法与蛋白质组学类似,涉及的核心技术包括蛋白质的分离、纯化、鉴定、功能注释、相互作用研究和表达调控研究等。植物蛋白质组学的研究,不仅能为植物生长发育和逆境
